Рекомбинант белок антигеннары еш кына берничә төрле эпитопка ия, аларның кайберләре эзлекле эпитоплар, кайберләре структур эпитоплар.Денатурланган антиген белән хайваннарны иммунизацияләү ярдәмендә алынган поликлональ антителалар - аерым эпитопларга хас булган антителалар катнашмасы һәм гомумән табигый структураларны яки денатурланган максатлы протеиннарны табу өчен кулланылырга мөмкин.Денатурланган протеиннарны иммуноген буларак куллануның бер ягы - денатурланган аксымнар күбрәк иммуноген булырга һәм хайваннарда көчле иммун реакция уята ала.
Escherichia coli экспрессия системасы гадәттә антигеник максатларда сайлана, чөнки ул вакыт һәм акча ягыннан иң кыйбат система.Максатлы протеинны белдерү мөмкинлеген һәм чистарту уңайлылыгын яхшырту өчен, кайвакыт билгеле бер домен кебек максатлы протеинның кечкенә фрагменты гына күрсәтелә.
Белгечләрнең өч үлчәмле төзелеше
Протеинның конкрет домены
Антитело әзерләү максаты wb ачыклау өчен генә булса, синтетик кечкенә пептидны антиген итеп куллану экономияле һәм тиз, ләкин пептид сегментының урынсыз сайлануы аркасында иммуногенитетның зәгыйфьләнүе яки яңартылмау куркынычы бар.Антитело әзерләү озак вакыт таләп иткәнгә, экспериментның уңышлы булуын тәэмин итү өчен полипептид антиген кулланып антителалар әзерләү өчен еш яки өч төрле пептид сегменты сайлана.
Иммунизация өчен полипептид антигенның чисталыгы 80% тан артык булырга тиеш.Higherгары чисталык теоретик яктан яхшырак спецификацияле антителалар ала алса да, практикада хайваннар һәрвакыт күп санлы специфик антителалар җитештерәләр, шулай итеп антиген чисталыгының өстенлекләрен каплыйлар.
Моннан тыш, кечкенә пептидлардан антителалар әзерләү, иммуногенитетны көчәйтү өчен, тиешле йөртүче антиген белән үзара бәйләнештә булырга тиеш.Ике киң таралган антигеник йөртүче - KLH һәм BSA.
Пост вакыты: 23-2023 март