Биологик тикшеренүләрдә гадәттә озын эзлекле полипептидлар кулланыла.Аларны алу өчен 60тан артык аминокислоталар булган пептидлар өчен ген экспрессиясе һәм SDS-PAGE кулланыла.Ләкин, бу ысул озак вакыт ала һәм соңгы продуктны аеру эффекты яхшы түгел.
Озын пептид синтезы өчен проблемалар һәм чишелешләр
Озын пептидлар синтезында без һәрвакыт проблема белән очрашабыз, ягъни синдездагы эзлеклелекнең артуы белән конденсация реакциясенең стерик киртәсе арта, һәм реакция тулы булсын өчен реакция вакыты көйләнергә тиеш.Ләкин, реакция вакыты озынрак булса, шулкадәр начар йогынты ясала, һәм максатлы пептидның бер өлеше барлыкка килә.Мондый калдыклар - дефицит пептид чылбырлары - озын пептид синтезында җитештерелгән төп пычраклар.Шуңа күрә, озын пептид синтезында без җиңәргә тиеш төп проблема - югары сыйфатлы реакция шартларын һәм реакция ысулларын барлау, аминокислота конденсация реакциясен тулырак һәм тулы итү.Моннан тыш, реакция вакытын киметегез, чөнки реакция вакыты озаграк, контрольсез як реакцияләр шулкадәр күбрәк, продуктлар катлаулырак.Шуңа күрә түбәндәге өч пунктка йомгак ясала:
Микродулкынлы синтез кулланырга мөмкин: Синтез процессында очрый торган кайбер аминокислоталар өчен интеграль булмаган, микродулкынлы синтез кулланырга мөмкин.Бу ысул искиткеч нәтиҗәләргә китерә, һәм реакция вакытын бик киметә, һәм ике төп продукт формалашуны киметә.
Фрагмент синтезы ысулы кулланылырга мөмкин: Кайбер пептидларны гомуми синтез ысуллары белән синтезлау авыр булганда һәм чистарту җиңел булмаганда, без пептидның билгеле бер сегментында берничә аминокислотаның тулы конденсациясен пептид чылбырына кабул итә алабыз.Бу ысул синтездагы күп проблемаларны чишә ала.
Асилхидразид синтезы кулланылырга мөмкин: пептидларның акилхидразид синтезы - N-терминалы Cys пептидын һәм С-терминал полипептид гидразид химик сайлап реакциясен пептид бәйләү ысулына ирешү өчен химик сайлап алу реакциясе.Пептид чылбырындагы Cys позициясенә нигезләнеп, бу ысул бөтен пептид чылбырын берничә эзлеклелеккә бүлеп, аларны синтезлый.Ниһаять, максатлы пептид сыек фазалы конденсация реакциясе аша алына.Бу ысул озын пептидның синтез вакытын киметеп кенә калмый, соңгы продуктның чисталыгын да сизелерлек арттыра.
Озын пептид чистарту
Озын пептидларның үзенчәлеге чиста пептидларның катлаулы компонентларына китерә.Шуңа күрә HPLC тарафыннан озын пептидларны чистарту да кыен.полипептидны чистарту процессының амилоид сериясе, күп тәҗрибәне үзләштерә һәм озын пептидны чистартуда уңышлы кулланыла.Яңа җиһазлар кулланып, күп чистарту системаларын кушып, кабат-кабат аеру һәм башка тәҗрибә ысулларын кулланып, озын пептидны чистартуның уңыш дәрәҗәсе зурайды.
Пост вакыты: 18-2023 апрель