Флуоресцент резонанс энергия тапшыру (ФРЕТ)
Флуоресцент резонанс энергия тапшыру (ФРЕТ) - радиатив булмаган энергия тапшыру процессы, анда донор дулкынланган дәүләт энергиясе кабул итүченең дулкынланган халәтенә молекуляр электр парларының үзара тәэсире аша күчерелә.Бу процесс фотоннарны үз эченә алмый, шуңа күрә радиатив түгел.Бу анализ тиз, сизгер һәм гади булу өстенлекләренә ия.
ФРЕТ анализында кулланылган буяу бер үк булырга мөмкин.Ләкин күпчелек кушымталарда төрле буяулар кулланыла.Кыскасы, якты резонанс энергиясен күчерү - донор төркеме дулкынлангач, донордан (буяу 1) аккредиторга (буяу 2) күчерү.Гомумән алганда, Донор флюорфор группасының эмиссия спектры Аксессуар төркеменең үзләштерү спектры белән каплана."Ике флюорфор арасы туры килгәндә (10 - 100 А), флорофор энергиясен донордан аккредитациягә күчү күзәтелергә мөмкин."Энергия тапшыру ысулы рецепторның химик төзелешенә бәйле:
1. Молекуляр тибрәнүгә әверелә, ягъни энергия тапшыруның якты нуры юкка чыга.(Рецептор - җиңел сүндергеч)
2. Эмиссия рецепторның үзенә караганда көчлерәк, нәтиҗәдә икенчел флуоресцент спектрында кызыл үзгәрешләр барлыкка килә. "(Рецепторлар - якты эмитерлар).
Донор төркеме (EDANS) һәм кабул итүче ген (DABCYL) ВИЧ протеазының табигый субстратына бертөрле бәйләнгәннәр, һәм субстрат өзелмәгәндә, DABCYL EDANSны сүндерә ала, аннары фтор белән таныша алмый.ВИЧ-1 протеазын өзгәннән соң, EDANS DABCYL белән сүндерелми, һәм EDANS люциферазлары соңрак табылырга мөмкин.Протеаз ингибиторларының булуы EDANSның флуоресцент интенсивлыгы үзгәрү белән күзәтелергә мөмкин.
ФРЕТ пептидлары - пептидазның билгесезлеген өйрәнү өчен уңайлы корал.Аның реакция процессын өзлексез күзәтеп була, шуңа күрә ул фермент эшчәнлеген ачыклау өчен уңайлы ысул белән тәэмин итә.Донор / кабул итүче пептид бәйләнешләренең гидролизыннан соң җитештерелгән шан наномоляр концентрацияләрдә фермент активлыгын тәэмин итә.ФРЕТ пептиды тотрыксыз булганда, ул эчке флэшның кинәт юкка чыгуын күрсәтә, ләкин донор / кабул итүче каршындагы пептид бәйләнеше өзелгәч, ул флэш чыгара, ул өзлексез ачыклана һәм ферментларның активлыгы бәяләнә ала.
Пост вакыты: 14-2023 август